Chele;c-IOO法在同一离心管中完成提取过程,厦门亲子鉴定避免了样本DNA的损失。但DNA纯度不如有机试剂提取法,残留过多的EDTA、盐和蛋白酶等均会影u扩增反应,案件检材中常见的抑制物如土壤、血红索衍生物等也会干扰PCR反应,有时需要对提取的模饭DNA进行纯化处理。
2-引物人工合成的寡核苷酸序列与靶DNA片段-两侧魏的序列互补,周此引物序列限定了PCR产物的长度和特异性。限于Taq DNA聚合酶的链延伸活性,被扫‘增的靶片段长度一股在500bp以下效果较好。引物一般长15--30bp,G+C含ilt 45%~55%,4种碱甚随机分布,避免出现嘌呤、嘧啶堆积现象。引物内部不应形成二级结构·两条引物之间尤其是3’末端不应有互补链存在。引物3 7端的碱基是影响PCR成功和特异性的关键冈索.5’端的碱基组成对反应特异性影响较小,厦门亲子鉴定可以根据检测分析要求进行修饰,如连接标记物、引入限制jlf识别序列等.
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